工具：蛋白濃度計算器

蛋白濃度計算器是美國AAT Bioquest設計的一種在線(xiàn)即時(shí)濃度計算工具，以方便研究人員準確、便捷的進(jìn)行濃度計算。

如果已經(jīng)知道蛋白分子量和摩爾吸收系數，可以根據比爾-朗伯定律，計算溶液中蛋白的濃度。λ_max 指的是吸收最強值所對應的波數，對于蛋白來(lái)說(shuō)，最大吸收波數一般使用 280 nm。最大吸收波長(cháng)處的吸光率可以通過(guò)分光光度儀來(lái)測量，在測定蛋白的吸收光譜時(shí)需注意以下幾項：

1. 蛋白需要溶解完全，任何蛋白的沉淀會(huì )給濃度的測量和計算帶來(lái)偏差。

2. 吸光度的讀數不應該超過(guò)儀器的量程，導致吸收曲線(xiàn)出現平臺。如果出現這種情況，應該稀釋蛋白溶液再進(jìn)行測量。

3. 此蛋白濃度計算式是采用 1cm 標準光程作為基準，應使用 1cm 寬的石英比色皿，如果使用其它尺寸的分光皿，所測的值應予校正。

蛋白濃度計算原理

示意圖

注：濃度計算所需的所有數據均根據實(shí)際實(shí)驗及所選蛋白進(jìn)行調整（消光系數及分子量會(huì )根據您在計算工具中的蛋白選擇而自行調整）。計算工具鏈接：https://www.aatbio.com/tools/calculate-protein-concentration

操作步驟

1.選擇所要分析的蛋白，如果不是選項中的蛋白，請選擇 "custom sequence"，然后輸入蛋白氨基酸序列。

2.輸入最大吸收的波長(cháng)。蛋白一般最大吸收在 280 nm。但是，不同蛋白有不同的最大吸收波長(cháng)，請按儀器所測的最大吸收波

長(cháng)為準，輸入最大吸收峰處的波數。

3.如果測量使用的蛋白溶液是已稀釋的溶液，請輸入稀釋的倍數，用以計算蛋白的原始濃度。

4.如果所使用的比色皿的光程不是 1cm，請輸入正確的光程。

5.點(diǎn)擊 "計算" 后即可顯示蛋白濃度。