產(chǎn)品名	SDS-PAGE預制膠(Tris-Gly)
別名
英文名
CAS號
分子式
分子量
EINECS編號
MDL號

SDS-PAGE (Polyacrylamide Gel Electrophoresis)蛋白電泳技術(shù)廣泛用于蛋白質(zhì)的分離純化、檢測、鑒定、分子量分析等實(shí)驗，是生命科學(xué)研究中最基本的實(shí)驗技術(shù)之一。常見(jiàn)的Western印跡(Western blot)檢測就是基于SDS-PAGE的。
與傳統的Tris-Glycine凝膠不同，SDS-PAGE預制膠使用中性pH緩沖液制備，不含SDS，既可用于變性蛋白電泳，也可用于非變性蛋白電泳。電泳時(shí)采用推薦的含SDS的電泳液，即可獲得常規的SDS-PAGE的電泳效果。

使用說(shuō)明：
1.將 SDS-PAGE預制膠從包裝袋中取出， 撕去膠板底端橙色膠紙。
2.將預制膠固定在電泳槽中，平穩、緩慢地拔出梳子。
3.內槽加滿(mǎn)電泳液，外槽的電泳液需要加到與內槽持平的位置或稍低，但不可漫過(guò)膠板。用移液槍吸取電泳液輕輕吹打加樣孔，將加樣孔沖洗干凈，去除氣泡和殘留的儲存緩沖液。
(可使用常規的Tris-Glycine電泳緩沖液)。
4.上樣：將10微升槍頭或專(zhuān)門(mén)的上樣槍頭的尖端垂直方向輕輕插入到上樣孔中即能獲得非常理想的上樣效果，槍頭不能戳破凝膠，更不能使膠板變形導致樣品泄漏。注意：最佳上樣量須通過(guò)實(shí)驗來(lái)確定，樣品過(guò)量會(huì )導致條帶拖尾和失真。
5.將電泳槽蓋子蓋好，并將電源線(xiàn)插頭插入電泳儀電源插孔(紅對紅，黑對黑)。推薦使用先低壓80V電泳20分鐘，然后換高壓120V電泳約50-75分鐘，或者直接100V電泳約80-100分鐘，直至溴酚藍條帶電泳至凝膠近底部或實(shí)驗預定的位置。如果對于條帶平整性要求不高，可以直接120-150V電泳50-80分鐘。
6.取出膠板，用小螺絲刀或小撬板沿兩板間的縫隙將兩板別開(kāi)，掰開(kāi)兩個(gè)板，用梳子邊緣將塑料板底端縫隙中的凝膠頂出。
7.如果用于Western，按照常規條件進(jìn)行轉膜即可。通常濕轉的電流為300-400mA，轉膜30-60分鐘。
常見(jiàn)問(wèn)題：
1.蛋白電泳示蹤染料溴酚藍扭曲、電泳大幅扭曲、電泳時(shí)間大幅度延長(cháng)：
可能原因是內外電泳槽緩沖液液面沒(méi)有一樣高，造成內槽緩沖液泄漏而導致。建議內槽加滿(mǎn)緩沖液，外槽的電泳緩沖液需要加到與內槽持平的位置或稍低，但不可漫過(guò)膠板，從而防止在電泳過(guò)程中內槽液面逐步下降。
2.使用自己配制的電泳緩沖液與上樣緩沖液電泳后條帶較模糊：
本預制膠pH為中性，對電泳緩沖液和上樣緩沖液的要求比傳統pH8.8的分離膠要高，緩沖液配制不當，或長(cháng)期放置變質(zhì)，都會(huì )對本預制膠的蛋白電泳效果產(chǎn)生影響。
3.在上樣時(shí)不可將槍頭過(guò)度插入上樣孔中，槍頭的過(guò)度插入會(huì )使膠板變形，導致樣品泄漏。
4.電壓為150V電泳時(shí)，每板膠的電流在30-55mA之間，隨著(zhù)時(shí)間增加電流會(huì )逐步降低。如果電流明顯不在這一范圍，需檢查電泳液的質(zhì)量，及內外槽電泳液液面是否一樣平。
5.濕轉時(shí)300-400mA恒定電流轉膜30-60分鐘，隨著(zhù)時(shí)間增加電壓會(huì )逐步降低，例如從約150-200V降低到100-150V左右。由于本預制膠厚度為1mm，須適當控制轉膜時(shí)間，以免蛋白轉到膜外?？梢愿鶕A制膠上殘留的預染marker及膜上的預染marker確定轉膜效率，并對轉膜條件進(jìn)行適當調整。如果出現預制膠和膜上的預染marker都很少，說(shuō)明蛋白有可能是轉到膜外了。
保存條件：
室溫保存，一年有效。4℃保存，兩年有效。
注意事項：
內槽電泳液和轉膜液建議新鮮配制，試劑純度不夠、反復使用或長(cháng)期放置的緩沖液會(huì )降低電泳效果。
電泳前請務(wù)必撕去膠板底端的橙色膠紙，否則電泳無(wú)法正常進(jìn)行。
本預制膠改進(jìn)了Bio-Rad的小型膠板兩側上端與硅橡膠密封條的凹陷結構，使其兼容幾乎所有廠(chǎng)家的小型膠電泳槽。但這使得本預制膠對于Bio-Rad和天能的內外槽電泳液存在少量泄露，此時(shí)建議外槽的電泳液加到與內槽持平的位置或稍低，但不可漫過(guò)膠板，從而防止電泳過(guò)程中因內槽液面逐步下降而導致電泳停止。電泳結束后的電泳緩沖液可以作為外槽緩沖液重復使用1-2次?；蛘邔枷萁Y構的硅橡膠密封條取出后反過(guò)來(lái)安裝，使其沒(méi)有凹陷的平滑面朝外，從而防止漏液。另外，天能等公司都已經(jīng)配套無(wú)凹陷結構的硅橡膠密封條，使用這樣的硅橡膠密封條就不會(huì )出現內外槽之間的漏液現象。
本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。